一
临床症状
1.最急型。发病突然，传播速度快，发病率和死亡率较高。有些鸡会在临床症状出现前死亡。其特征性症状主要有呼吸困难、痉挛咳嗽、伸颈张口呼吸等，还会因试图排出气管中的阻塞物而咳嗽或发出“咯咯”声。在鸡舍墙壁、地面、鸡笼等处可发现咳出的血凝块。2.亚急性型。发病缓慢，发病率较高，死亡率低，介于10%~30%。3.慢性或温和型。常见于最急型和亚急性型耐过的鸡。发病率仅有1%~2%，但是大部分感染鸡会因窒息而死。症状包括突发咳嗽和气喘，伴有口鼻流液和产蛋下降。二
病理变化
1.最急型。病死鸡病变主要集中在上呼吸道，典型病变包括带有血凝块的出血性气管炎、黏液性鼻炎及沿气管分布的带血黏液。2.亚急性型。病死鸡气管中带血或不带血的黏液性渗出物，喉和气管上部黏膜上附着*白色纤维素性干酪样假膜。3.慢性型。病死鸡可见气管、喉和口腔内有白喉和干酪样坏死斑及阻塞物。三
临床诊断
根据临床症状和病理变化可进行初步诊断，因鸡传染性喉气管炎的临床症状和病理变化主要表现上呼吸道改变，与鸡新城疫、传染性支气管有些相似，仅靠症状和病变容易误诊，可结合实验室检查综合分析。四
实验室检测诊断
（一）检测诊断标准表1鸡传染性喉气管炎检测标准（现行）
（二）检测诊断方法表2鸡传染性喉气管炎实验室诊断方法（现行）
1.鸡传染性喉气管炎病原学检测1）病*分离鉴定病料的采集：从活体采集病料，气管拭子优于口咽拭子及结膜拭子；从病死鸡采集病料，为避免污染可取整个头颈部，然后无菌采取鸡喉头和气管。实验室一般用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）和鸡肝/肾细胞这两种方法进行病*的分离培养。前者是接种于9~12日龄的鸡胚绒毛尿囊膜上，37℃孵育7d，弃去24h内死亡的鸡胚，取7d内死亡或7d后仍存活的鸡胚CAM，观察是否出现痘斑，出现痘斑则判为阳性；后者是接种于去除培养液的单层细胞上，37℃孵育7d，每天用显微镜观察细胞是否出现典型的合胞体细胞病变（CPE），有CPE则判为阳性。每个病例在进行3代以上盲传后仍不出现病变，方能被视为阴性。另外确诊判定上述两种方法分离的病*是否为ILTV时，应使用ILTV高免抗血清，在鸡胚或细胞上进行中和试验后分析。2）电镜观察取气管分泌物或上皮组织的悬液，进行染色及电镜观察。检查病料中是否存在疱疹病*颗粒。3）免疫荧光试验免疫荧光试验检查病*抗原时，可将从气管上刮取的上皮细胞涂在载玻片上，也可将气管制成冰冻切片。采用直接染色法或间接染色法，直接染色法应用已知未感染样品当对照组，间接染色法应用非免疫鸡血清当对照组。阳性结果细胞内存在特异性核内荧光；反之阴性。间接免疫荧光试验结果判定时，应注意气管病料中的内源性鸡IgG可与FITC标记的抗鸡IgG发生非特异性结合。4）琼脂免疫扩散用ILTV高免血清作为阳性对照，加在中心孔；周围六孔分别加阳性病*抗原、阴性病*抗原及待检疑似病*样品。平皿置于湿盒内，室温孵育24~48h。当阳性病*抗原与中心孔间出现沉淀线，阴性病*抗原无沉淀线时可判读结果，待检病*样品与中心孔间有沉淀线则判为阳性，反之为阴性。5）酶联免疫吸附试验（ELISA）ILT抗原ELISA检测，一般采用双抗体夹心法测定抗原。用已知抗体吸附在固相载体微孔聚苯乙烯塑料板上，通过抗原抗体特异性结合吸附待测样品中的抗原，加酶标抗体和底物后，在相应酶底物的作用下生成有色物质，其颜色深浅与标记物中相应的抗体含量呈正比，由此测定抗原的含量。6）组织病理学检查气管、眼睑和肺脏可用于ILTV组织病理学的检查，其中纵向气管切片比横向切片更适合检查整个气管。切片经过苏木精—伊红染色后，感染病例可见核内包含体。7）分子生物学PCR技术检测在ITLV的诊断中已被广泛应用，它检测的敏感性要高于病*分离法和组织病理学检查。PCR技术结合限制性片段多态性分析，除了可确诊病*特征，还可区分疫苗株和野*株。荧光PCR检测技术相对于传统的病*分离法和使用凝胶电泳的标准PCR法，可快速检测ILTV。2.鸡传染性喉气管炎血清学检测1）ELISAILT抗体ELISA检测现已制成商品化试剂盒。其原理是用已知抗原吸附在固相载体微孔聚苯乙烯塑料板上，通过抗原抗体特异性结合吸附待测样品中的抗体，加酶标抗体和底物后，在相应酶底物的作用下生成有色物质，其颜色深浅与标记物中相应的抗体含量呈正比，由此测定抗体的含量。ELISA试验非常敏感，最适用于ILT抗体的检测。ILTV感染宿主后1~2周可检测到抗体，2周后可达到峰值。疫苗免疫鸡群的抗体应答变化较大，免后2周内不宜进行ELISA检测。2）琼脂凝胶免疫扩散试验将鸡胚CAM或细胞培养物制备的抗原，加在中心孔；周围六孔分别加已知的阳性血清、已知的阴性血清及待检血清。平皿置于湿盒内，室温孵育24~48h。当阳性血清与抗原孔间出现沉淀线，阴性血清无沉淀线时可判读结果，待检血清样品与抗原孔间有沉淀线则判为阳性，反之为阴性。琼脂凝胶免疫扩散试验在敏感性上不如ELISA、IFA和VN方法，但是其操作简便，成本低廉，适用于鸡群筛选。3）间接免疫荧光试验（IFA）间接免疫荧光试验是用特异性抗原与标本中相应抗体反应后，再用荧光素标记的第二抗体（抗抗体）与抗原-抗体复合物中第一抗体结合，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光，以检测未知抗体。结果以出现特异性染色的最高血清稀释度为终点。本法比琼脂凝胶免疫扩散试验敏感，缺点是易产生非特异性荧光，结果判读存在一定的主观性。4）中和试验（VN）VN试验是一种灵敏性和特异性较高的检测方法，可将等体积病*与倍比稀释的血清中和一定时间后接种于9~11日龄鸡胚CAM上或鸡胚肝/肾细胞。使用鸡胚CAM时，病*浓度为个鸡胚半数感染量（EID50），每个血清梯度至少接种5个鸡胚，结果以鸡胚CAM上不出现痘斑的血清最高稀释度为终点；使用细胞培养物时，病*浓度为个组织培养半数感染量（TCID50），结果以引起50%细胞出现病变的血清稀释作为终点，其中以细胞培养进行VN试验，1/8(原始稀释)或更高稀释度发生病*中和可视为阳性。“中科名兽医”APP下载方式：
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