LT是由传染性喉气管炎病*(InfectiousLaryngotracheitisVirus,ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性传染病,主要侵害鸡上呼吸道的喉头和气管的上皮细胞,同时对鸡的鼻窦、气囊和肺等产生影响,可导致患病鸡群出现严重的呼吸困难、气喘、打喷嚏和咳出带血的分泌物,严重影响鸡群的生长和发育以及生产性能,甚至导致死亡,产生巨大的经济损失。
ILTV隶属于疱疹病*科α疱疹病*亚科疱疹病*属1型,只有一个血清型,不同*株之间具有一定的免疫交叉保护。免疫后的鸡群和病鸡痊愈后,病*会长期潜伏于感染鸡的三叉神经,在应激条件下常常会出现周期性地排*,导致散*发生。
同时,ILTV在鸡与鸡之间的传代会明显增强*力,为该病的防控和净化带来了较大的难度。
一、流行现状和危害
1.1流行现状
1.1.1世界流行趋势
ILT发病迄今,已有近百年历史。该病年最早发生于美国,随后在加拿大、澳大利亚、德国、荷兰、英国等地发生和流行,逐渐在全世界形成一种地方流行性疫病。ILTV属于DNA病*,对外界抵抗力稍强。
尽管该病是第一个利用疫苗成功控制的家禽疫病,但ILTV野*株广泛存在,通常每3-5年就流行一次。在美国ILTV活疫苗广泛应用于肉种鸡和蛋鸡的免疫接种,商品肉鸡只在受到ILT威胁时才进行。流行病学调查显示,美国每隔7-10年往往会发生一次ILT疫情。
近期发生的ILT病例主要集中于商品肉鸡。年10月-年9月,美国加利福尼亚商品肉鸡场发生ILT爆发,短短一年中有59个场发生疫情,鸡的发病时间大多为6周龄。
分子流行病学调查表明,美国大多数肉鸡ILTV流行野*与CEO疫苗(鸡胚疫苗株)关系密切,无法区分,显示出较强的内在联系;而与TCO型疫苗(组织培养疫苗株)无关。
1.1.2中国流行趋势
ILT在中国发生由来已久,早在年,我国贵阳曾报道过该病。自上世纪80年代以来,该病伴随着我国养鸡业的蓬勃发展,逐渐成为我国的地方流行性疫病。过去该病的发病对象主要是蛋鸡和种鸡。但自年以后,该病在江苏、广东、山东等地的商品肉鸡中发生普遍。
年4月-年4月,山东济南、莱芜、临沂、潍坊等地规模化鸡场陆续发生该病,主要危害20-50日龄的白羽肉鸡和地方品种鸡,以30-40日龄发病居多。感染后的肉鸡疫病传播较快,发病率在80%以上,死亡率在5%-30%,严重的死亡率可高达45%,治疗效果不佳,通常以提前淘汰为结局。对潍坊等地的ILTV流行株测序表明,山东ILTV流行株在ICP4基因,与疫苗株CEO、中国经典强*王岗株(WG)的核苷酸同源性为%,暗示出,山东ILTV流行株可能于cladeI群,是与CEO疫苗相类似的*株(待发表论文)。
1.2经济损失
ILT可导致感染家禽的死亡、蛋产量下降、生长发育不良和继发感染等,同时,间接提高了生产成本,如疫苗、发病肉鸡的提前淘汰和肉产品的残次品等,经济损失巨大。
美国家禽业每年因此病所造成的经济损失高达数亿美元。中国缺乏对该病经济损失的具体统计数据,而当商品肉鸡一旦发病,无特效药可以治疗,只能淘汰鸡群,通常是一个灾难。
二、临床发病和诊断
2.1流行病学
感染宿主和日龄:主要感染鸡,野鸡、鹌鹑、孔雀等也可感染,鸭、鹅等水禽不感染。不同日龄的鸡均可感染,只有育成鸡和产蛋鸡才表现典型的病症。
2.1.1传染源发病鸡的呼吸道分泌物、排泄物及其代谢物,携带污染病*的人员、衣物、车辆等均是传染源。痊愈鸡和免疫CEO疫苗的鸡群可长期携带病*。
美国的一项危险性因素评估报告发现,位于感染鸡场1英里内的鸡群,其发病几率是对照鸡群的36倍。大量的研究表明,CEO疫苗过去常常用于肉种鸡和蛋鸡的接种,并作为一个病*储存库长久存在。通过禽与禽的传代,该病*可以逐渐恢复*力,在转群、产蛋等各种应激条件性向外排*并可能发病。
2.1.2传播途径该病*仅水平传播,不垂直传播。
不同的饲养模式、管理方式等似乎对ILT疫情影响不大。最近,人们观察到,不管是笼养,还是地面饲养;不管是机械化饲养还是人工散养等,都有可能传播该病。
2.1.3发病时间一年四季都可发生,但以寒冷的季节多见。
尽管ILT的爆发有可能发在一年中的任何时间,但大多数疫情发生在秋季和冬季。人们普遍认为,正是由于病*对热的敏感性,大多数ILT疫情暴发于秋季和冬季,春季和夏季相对减少。但是,近几年,美国东南部则在春天高发。Jordan报告说,英格兰发生的11次ILT疫情中有8次发生在春季和夏季。
2.1.4发病率和死亡率对易感鸡群的感染率为90%-%,死亡率为5%-50%。
2.2临床发病
ILT在临床上通常有三种形式:最急性型、亚急性型和温和型。
2.2.1最急性型发病突然,呼吸困难,伸颈呼吸,咳出血痰,
是呼吸道中症状较为严重的;传播迅速,发病率较高,死亡率在20%-50%;通常是强壮鸡先死亡。特征性病变出现在上呼吸道,包括出综述50PoultryScience成就未来血性气管炎、粘液性鼻炎,气管内充满带血的气管粘液。
2.2.2亚急性型发病较慢,临床表现为突发气喘、打喷嚏,眼睛流泪,甩鼻,在死亡前呼吸道症状可能持续数天;产蛋鸡产蛋下降;发病率较高,但死亡率较低,一般仅有5%-30%。剖检死亡鸡,病变一般较轻,气管内有带血或不带血的渗出物,在喉头或气管粘膜上附有*色干酪样喉样膜。
2.2.3温和型临床症状比较轻,病理变化不典型,或者是最急性型和亚急性型的耐过鸡。发病率一般仅有1%-2%,但大部分的感染鸡最终会导致死亡。
2.3诊断要点
依据发病鸡群呼吸困难、咳血等特征性病变等可对ILT做出初步的诊断,但家禽的其他呼吸道病原亦可引起类似的病症。ILTV的确诊应依据实验室诊断,应基于多个实验的综合诊断,包括组织病理检查、病*分离、核酸检测或基因组的检测。
临床用于快速诊断ILTV感染的最常见的检测方法是把组织病理学检查与实时荧光定量PCR相结合。
三、疫苗防控
ILTV疫苗是成功控制家禽ILT的第一个疫苗,也是第一个通过疫苗控制家禽病原体的典范。
最初用于免疫接种的疫苗株*力较强,且必须通过刷肛接种到泄殖腔,才能达到良好的效果。在过去的40年里,利用鸡胚传代和组织连续培养以及病*重组技术陆续培育出了多种ILTV疫苗。目前,有三种主要类型的商业化ILTV疫苗:鸡胚传代(CEO)、组织细胞培养(TCO)和重组疫苗。
3.1免疫机理研究表明,针对ILTV的高免疫血清和母源抗体均不能对感染鸡提供保护。免疫接种切除法氏囊的鸡仍能抵抗ILTV强*的攻击,而胸腺切除鸡的抵抗力则显著下降。
在ILTV接种后,感染鸡血清中的中和抗体或IgG抗体滴度增加,而气管粘膜中检测到的IgA、IgM和IgG的抗体间歇性增加。所有这些早期的研究均证实了细胞免疫在ILTV免疫中的核心作用和体液抗体的辅助功能。最近,通过利用减*CEO活疫苗滴鼻点眼免疫鸡的气管转录谱表明,参与MHC类和MHCII类抗原提呈和加工途径的基因被上调。激活MHCI类抗原通路对于刺激抗原特异性CD8+T细胞至关重要。此外,免疫途径也极其关键,因为它为减*活疫苗提供了不同等级的保护,特别是喷雾或饮水免疫。与喷雾相比,滴眼已被证明可提供更均匀的保护和较少的疫苗反应。
3.2疫苗种类
3.2.1CEO疫苗来源于鸡胚可以通过滴眼、饮水或喷雾等途径免疫。
优点:使用方便,适合各种途径免疫,每种方法均能够提供较好的群体免疫效果。80%以上的群体免疫率可阻断疫病的传播,这对于家禽规模化、工业化生产至关重要。
缺点:疫苗免疫可能导致散*,存在演化为强*力的风险,有安全隐患。
3.2.2TCO疫苗来源于组织培养,只能通过滴眼免疫,需要人工接种。
优点:安全,不散*,免疫效果确实,即使是经过禽类的传代,不存在*力返强风险。
缺点:免疫途径单一,费力,成本高,对于商品肉鸡业来讲,缺乏竞争力。
3.2.3重组疫苗来源于病*重组技术。
3.2.3.1禽痘病*
(FPV)FPV载体表达GaHV-1糖蛋白B和UL32蛋白。已在美国获得许可,用于肉种鸡的翼部疫苗接种和1日龄蛋鸡的皮下接种。
3.2.3.2火鸡疱疹病*疫苗(HVT)表达GaHV-1糖蛋白I和D,以及最近表达GB糖蛋白。
在美国,HVT载体疫苗最初只用于皮下和经皮接种。目前蛋鸡和肉种鸡在1日龄接种,而肉鸡在卵内接种。实验表明,卵内接种HVT疫苗可以提高肉鸡的生长性能,减轻临床症状,防止死亡率。然而,它们在保护效果方面不如CEO疫苗更有效。
3.3疫苗程序中国是一个养禽大国,疫情复杂,ILT的流行情况不一。
同时还存在着多品种(鸡种)、多日龄(鸡群)和多产品(疫苗种类)的不同组合,免疫程序的制定应综合考虑,因地制宜。
3.3.1疫区
3.3.1.1蛋鸡和肉种鸡
首免4-5周龄,疫苗选用TCO或CEO疫苗;二免12-14周龄,疫苗选用CEO疫苗。
一般情况下,不能对4周龄以下的雏鸡(对雏鸡可致病)和18周龄以上的鸡进行免疫接种(疫苗对开产前鸡有一定的致病性)。
3.3.1.2商品肉鸡通常不接种疫苗,除非周边地区疫情严峻。
目前,CEO疫苗是唯一一个可以在肉鸡爆发ILT时实际应用的疫苗,因为CEO便于应用,可快速实现群体免疫。此外,商品肉鸡的免疫需要进行风险性评估。一旦使用CEO疫苗,在经过不同批次商品肉鸡群鸡与鸡的传代后,其*力必然增强,特别是当生物安全出现纰漏时,很容易导致下一批次肉鸡爆发ILT的几率增大。
3.3.2非疫区无本病流行的地区最好不进行免疫接种,否者易造成污染。
四、借鉴美国
ILT控制经验ILT是美国一个重要的地方性流行疾病,每隔几年就会零星发生。
为针对ILT的发生,在美国动物健康委员会的指导下,部分企业、*府、学校等为防控ILT达成了一些共识:
4.1成立一个专业委员会
委员会可由美国本州内的肉鸡公司、蛋鸡养殖者和经营者以及非商业鸟类养殖者的代表共同组成,涵盖来自实验室、大学和*府管理机构的代表等。目标是共同努力,控制ILT发生。
在相关的诊断标准、决定等被委员会的代表们集体同意并确定后,所有人员都必须遵守。这是成功控制ILT发生的一个最重要问题。该地区的整个养殖行业都必须遵循相同的规划。
通常设一个中心部门专门处理ILT。十分重要的是,所有养殖场必须将所有的ILT病例报告给中心,一旦确定ILT发生,中心就会立即做出相关的决定,并将所有的信息以电子的方式,以最快的速度反馈给企业,包括各项决策如何时开始或停止疫苗接种等。
4.2生物安全
生物安全措施对于预防ILT由一个群体传播到另一个群体十分有效。
它包含了这样一些明确的隔离措施,如确保饲养场与任何高风险的活动如农场参观者等必要的隔离距离;避免病*通过访客或污染物进入场区;避免社会服务人员、饲料商和抓鸡队等传播感染;规避养殖者和公司人员通过会面、共享的设备以及混合操作所带来的风险等。
4.3快速诊断
所有疑似感染ILT的病例都应以非活鸡形式提交实验室处理。选择6-7只具有典型症状的发病鸡,实施安乐死,利用三层袋子包装,外层袋子可以消*,运送到实验室。在实验室里,运输车内外均应利用消*剂喷洒,在确保生物安全的前提下接收病料。快速地做出诊断对于尽快实施ILT控制程序至关重要。可能的测试包括直接荧光抗体(DFA)测试、组织病理学、聚合酶链反应(PCR)、病*分离和免疫组织化学。富有丰富经验的临床服务人员的现场观察不容忽视。
第一例ILT的病例应使用至少两种不同的实验室检测方法来验证,只有二者均为阳性时方可确定。但是,对于蛋鸡的爆发,养殖企业一旦发现典型的临床病症,结合一项敏感性高、特异性强的实验室检测阳性结果,如荧光抗体检测就可以确定阳性感染。组织病理学也可以在几小时内提供结果。研究表明,DFA测试与组织病理学之间的一致性为96%。许多实验室也使用PCR进行诊断,时间快,准确度高,可以在递交样品后4h内发布结果,时间快速,反应及时。
4.4及时处置
阳性农场立即隔离。农场应执行严格的生物安全措施。访问农场的服务应该停止,感染的病鸡应尽快无害化处理。为了降低疾病传播的风险,应慎重选择运输病鸡的行车路线,尽可能减少与易感鸟类接触的机率。有人建议等待感染鸡群排*减少时再处理鸡群,但可能会导致疫病蔓延到临近养殖场区的其它栋舍,从而延长鸡群在农场里的滞留期。在鸡群处理后,鸡舍应在38℃(F)热处理h。垃圾应在屋外堆肥处理。在垃圾处理开始之前,必须妥善处理处置鸡场内的流浪鸡或死鸡,这一点十分关键。
受感染的养殖场应保持至少3周的卫生、清洁和消*间隔,确保鸡场内几乎没有任何病*能够存活。此外,在引入雏鸡前后的一周内,育孵室里的高温有助于进一步抑制养殖舍内的任何病*。
4.5建立生物隔离区
一旦确诊ILT,应立即通知州内的所有养禽企业。最好对第一个病例中分离出来的病*进行基因分型以确定其与疫苗病*的相关性,合理选择疫苗。控制ILT计划的最重要目标之一就是避免疫苗*在养殖场周围传播,同时要做好防控和生物安全的每一步工作。
利用地理信息系统(GeographicInformationsystems,GIS)绘制发病鸡场示意图,并在其周围绘制一个5英里区域,以便对该区域内所有已确定的农场立即加强生物安保措施。在第一个病例出现之后,迅速做出反应,这一点至关重要,应确保每次爆发的病例数量发生最少。每增加一例,就应该立即通知辖区内所有养禽的企业。加强所有肉鸡养殖场的生物安全,意味着至少隔离2周,同时限制常规的访问(停止服务性访问),停止清理房屋和垃圾,禁止对外传播。
养殖公司应立即实施严格的生物安全措施,包括有人员、饲料和设备的流动,以及清洗和消*往加工厂运输鸡的车和笼子。与此同时,给联合会的所有养殖者起草一封信,告知他们这里的情况。另一封信则寄给服务于该地区的委员会、公司以及期待来访的访客。
如果他们需要访问隔离区内的任何企业,均需要提前联系,并获得生物安全的许可。随着生物安保措施的加强,养殖者的认识逐步提高,要求他们要随时通过电话向其服务人员报告任何可疑的病例。养殖者的警觉性对于确定是否遵守生物安全计划非常关键。
养殖者和公司制定的生物安全措施越快越好,所有行业参与者之间的沟通和联系愈紧密愈好。如果连续在4-6周没有新的病例,生物隔离区就可以解除。
4.6预防接种的考虑因素
疫苗接种在预防ILT新病例方面非常有效,是控制ILT中使用的重要工具,但这一做法存在许多隐患:一是在疫苗免疫区引入了大量的CEO疫苗*,并成为潜伏感染;免疫后的肉鸡在运输到加工厂的路上可能会排*,潜在持续性地散播;二是疫苗反应有时会很严重,导致禽类在增重和饲料转换方面表现不佳。
复杂的疫苗反应还可能导致发病率和死亡率增高,甚至导致气囊炎和肉品质量降低。面临这样的抉择,需要决策者在两者之间要做出一个利弊权衡。假如不接种则会面临疫情扩散,而接种疫苗就要承受散*、不良反应等风险。在病例确诊以后,委员会决定是否接种疫苗还取决于下面几个重要因素。
倾向于接种疫苗的情况是:①病例在流行病学上无法解释(孤立的农场和生物安全养殖区);②诊断病例发生在生物安全区之外(病*“跳”到区域边界);③免疫鸡群发病(在严格的生物安全措施下,仍有大量的病*攻击);④在秋季暴发病,因为夏季通常能够有助于阻止春季自然暴发;⑤诊断的疾病频率很高(每周在一个地区发生4-5例,暗示田间的野**力较强,且具有强烈的传播性)。
4.7疫苗接种期管理
目前,美国仅有CEO疫苗适合于商品肉鸡ILT的免疫。
养殖公司在12-18d可通过饮水或喷雾免疫疫苗,也可以单独或联合新城疫和/或传染性支气管炎等其它疫苗免疫。疫苗接种的决定是由委员会投票决定的,在距离ILT病例20英里内的所有公司都有投票权。一旦开始疫苗免疫,就必须确定疫苗免疫隔离区和免疫期限。
疫苗免疫隔离区要科学合理,区域太大不宜遵守,而区域太小则往往无效,达不到效果。应确保在免疫区和未免疫区的养殖场之间拥有足够的隔离距离(至少1英里)。当企业开始为肉鸡接种疫苗时,房屋清理和垃圾扩散至少要停止大约6周。垃圾管理有助于预防这些疾病在农场的传播。
根据疫病每年爆发的时间,免疫期限通常要至少涵盖肉鸡的两个完整生长周期,或者大约14-16周。如果在免疫隔离区之外发生ILT新病例,就要考虑新的决定,是否扩大免疫接种的区域。只要有新的病例确诊,就表明疫情仍在持续,就不能停止疫苗的接种。特殊情况下,由于疫病传播快速,在疫病爆发期间,要尽可能扩大疫苗的接种区。
尽管在ILT的控制计划中,每一次发病过程可能是一样的,但至于每一次如何爆发,怎样爆发?则千差万别,很难预测。只有当在至少4周(三个潜伏期)内没有确诊病例时,委员会才会考虑停止接种疫苗。停止疫苗接种具有挑战性,因为易受感染的鸡群可能会被再次爆发。确定一个日期,届时不再使用疫苗。从那一天开始,在另一个6周的时间里,养殖者再次被要求保持垃圾在农场里面,避免垃圾扩散。
必须牢记的是,在停止接种期间和之后6周保持无病例。
五、根除
ILT的技术可行性ILTV具有高度的宿主特异性,对大多数禽类不易感染;病*在鸡体外十分脆弱,消*、清洁和消*剂等对其均有效;ILTV属于DNA,基因组相对比较稳定,病*不易发生变异;疫苗免疫有效果,且TOC疫苗点眼不散*;ILTV重组疫苗也不散*。
上述特点决定了,在技术层面上,根除ILT完全有可能。而选择利用TOC疫苗和重组疫苗,将是ILT走向根除的关键一步。此外,非商业家禽以及禽类产品相关产业,因为它们可能是ILTV的潜在携带者和传播者。
因此,在制定根除方案时必须纳入整体规划,确保根除目标万无一失。
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